Клинический анализ крови у собак с гемангиосаркомой селезёнки

Аннотация

Гемангиосаркома — самая распространённая опухоль селезёнки у собак. В этом исследовании клинический анализ крови проводился в группе из 21 животного с гемангиосаркомой селезёнки. Были обнаружены: микроцитарная гипохромная анемия (MCV 60,05±2,24 фл, MCH 21,33±0,87 пг, гемоглобин 103,47±8,85 г/л), эритропения (4,72±0,43 T/л), тромбоцитопения (222,67±26,36 Г/л), нейтрофильный лейкоцитоз (16,41±1,78 Г/л), лимфопения (16,47±1,67%), эозинопения (1,28±0,38%).

Ключевые слова: клинический анализ крови, собаки, гемангиосаркома селезёнки.

Введение

Гемангиосаркома (злокачественная гемангиоэндотелиома или ангиосаркома) — исключительно агрессивное злокачественное новообразование, возникающее из эндотелия сосудов. Это новообразование встречается чаще у собак, чем у других животных [14]. Исследование в группе из 655 золотых ретриверов, умерших от новообразований в США, показало, что гемангиосаркомы (22,64% от всех опухолей) и лимфомы (около 18,4%) были наиболее значимыми новообразованиями для этой породы [12]. Гемангиосаркома является самой распространённой опухолью селезёнки у собак. По оценкам, частота случаев её возникновения составляет более 50% всех опухолей селезёнки и около 70% злокачественных опухолей [22]. При висцеральных формах гемангиосаркомы клинические признаки варьируют в зависимости от первоначальной локализации.

Вторичные изменения параметров крови (гематологический паранеопластический синдром) у онкологических больных — наиболее частые параклинические нарушения. Изменения могут варьировать в различных типах опухолей, но наиболее специфичными для гемангиосаркомы являются анемия, гемолиз, тромбоцитопения, гипофибриногенемия [11]. В некоторых случаях изменения картины крови могут служить ранними признаками протекающего опухолевого процесса.

Настоящая работа является частью масштабного исследования, направленного на определение гематологических изменений (картина красных и белых кровяных клеток) у собак, поражённых некоторыми злокачественными опухолями.

Материалы и методы

Исследования проводились на 21 собаке — пациентах клиники мелких животных факультета ветеринарной медицины, Стара-Загора, с 2007 по 2015 год. 17 из них были крупных и гигантских пород. Средний возраст пациентов составлял 9,6±0,63 года. У всех была подтверждённая гистопатологически гемангиосаркома селезёнки.

Образцы крови были собраны из v. cephalica antebrachii в пробирки с антикоагулянтом ЭДТА. Образцы исследовались немедленно. Оцениваемые показатели красной и белой крови: гемоглобин (г/л), гематокрит (%), количество эритроцитов (T/л), средний объём эритроцита (MCV, фл), среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH, пг), средняя концентрация гемоглобина (MCHC, г/л), ширина распределения эритроцитов (RDW,%), общее количество лейкоцитов (Г/л), количество тромбоцитов (Г/л), определялись на автоматическом гематологическом анализаторе Mindray BC-2800VET (Китай). Дифференциальный подсчёт лейкоцитов и отклонения в морфологии эритроцитов оценивались по окрашенным мазкам крови с помощью набора для быстрого окрашивания Hemacolor® (Merck, Германия).

Контрольная группа собак состояла из 10 клинически здоровых животных обоего пола весом 8–24 кг в возрасте 4–11 лет.

Образцы из разных частей неопластических новообразований были собраны для гистопатологического исследования. Они были обработаны 10% нейтральным формалином, рутинно обработаны [8], зафиксированы парафином, нарезаны в микротоме (толщина срезов 5 мкм) и окрашены гематоксилин-эозином (H/E).

Данные были проанализированы средствами статистического программного обеспечения (Statistica v. 6.1, StatSoft Inc., 2002). Для расчёта средних значений и стандартных ошибок средних использовалась описательная статистика. Различия между группами оценивались с помощью t-критерия Стьюдента с уровнем значимости P<0,05.

Илл. 1. Гемангиосаркома селезёнки у собаки. А. Макроизменения. Б. Гистологические изменения — плеоморфные клетки, кровеносные сосуды неправильной формы, заполненные кровью (гематоксилин-эозин, толщина среза 5 мкм)

Таблица 1. Изменения показателей картины красной крови у собак с гемангиосаркомой (n=21) и показатели собак контрольной группы (n=10). Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего

* P<0,05.
** P<0,01 в сравнении с контрольной группой.

Таблица 2. Изменения показателей картины белой крови у собак с гемангиосаркомой (n=21) и показатели собак контрольной группы (n=10). Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего

* P<0,05.
** P<0,01 в сравнении с контрольной группой.

Результаты

Макроскопические и гистологические исследования категорически подтвердили диагноз: гемангиосаркома селезёнки (илл. 1). Микроскопические обнаружения зависели от степени дифференциации опухоли. В дифференцированных формах обнаружены овоидные веретеновидные клетки с разной степенью дифференциации, формирующие неправильные просветы сосудов, заполненные кровью.

Полные анализы крови у собак с гемангиосаркомой селезёнки и контрольной группы здоровых собак продемонстрированы в таблицах 1 и 2.

Все параметры картины красной крови были статистически значимо изменены (P<0,01) в сравнении со здоровыми контрольными собаками. Отмечено снижение содержания гемоглобина до уровней ниже 120 г/л у 71,4% собак (n=15). Наименьшее измеренное значение было 45 г/л. Такая же тенденция наблюдалась в отношении количества эритроцитов и гематокрита с сильной положительной корреляцией (P<0,05) между содержанием гемоглобина и количеством эритроцитов (коэффициент корреляции Пирсона r=0,969). У 76,16% собак (n=16) выявлена эритропения. Выявлено существенное снижение (P<0,01) в отношении эритроцитарных показателей (MCV, MCH и MCHC) наряду с повышенным отклонением объёма эритроцитов (RDW). Количество тромбоцитов у собак с гемангиосаркомой также было ниже, чем у контрольной группы, в 47,6% случаев наблюдалась тромбоцитопения.

Определение степени анемии по шкале ВОЗ (Grotto, 2008) показало лёгкую анемию (уровень I и II) у 42,84% собак, уровень III в 14,28%, и такую же долю животных (14,28%) с самым тяжёлым, IV уровнем анемии (илл. 2).

При микроскопическом исследовании мазков крови выявлена значительная доля шистоцитов и микроцитов (илл. 3).

Изменения количества лейкоцитов показаны в таблице 2. Общее количество лейкоцитов у собак с гемангиосаркомой было статистически существенно выше (P<0,01), чем у контрольной группы. Лейкоцитоз выявлен у 38,08% собак (n=8), при этом у 5 пациентов (23,8%) наблюдался гиперлейкоцитоз до 34,2 G/L.

Снижение содержания эозинофилов отмечено у 66,64% (n=14) собак с раком, а у 11 из них (52,78%) наблюдалась ан-эозинофилия. Нейтрофилия с регенеративным сдвигом влево была обнаружена у 9 собак. Процентное содержание лимфоцитов и моноцитов имело тенденцию к значительному снижению. Лимфоцитопения была выражена у 33,32% собак, с самым низким содержанием 3%. С другой стороны, у 2 собак обнаружился лимфоцитоз (до 32%). Моноцитопения присутствовала у 38,08% (n=8) пациентов.

Илл. 2. Распределение собак с гемангиосаркомой по степени анемии

Илл. 3. Мазок крови собаки с гемангиосаркомой селезёнки, демонстрирующий шистоциты (белые стрелки) и микроциты (чёрные стрелки)

Обсуждение

Наблюдаемые анемия и эритропения являются типичным проявлением гематологического паранеопластического синдрома, сопровождающего злокачественное новообразование. Исследования почти всех видов рака показали, что анемия — важный прогностический маркер более короткой выживаемости пациентов со злокачественными образованиями [4].

При гемангиосаркомах анемия часто развивается вследствие угнетения эритропоэза, сокращения продолжительности жизни эритроцитов и потери крови вследствие кровоизлияний из растущих опухолей [19]. Повреждение эндотелия сосудов при гемангиосаркомах часто вызывает микроангиопатическую гемолитическую анемию [15]. В таких случаях наличие шистоцитов и сфероцитов в мазках крови является типичными микроскопическими находками, наблюдавшимися также и в настоящем исследовании. Сниженные значения эритроцитарных индексов, несомненно, определяют анемию у больных гемангиосаркомой как микроцитарную гипохромную, нерегенеративного типа [17].

Эти данные соответствуют результатам, демонстрирующим серьёзные изменения картины красной крови у собак с гемангиосаркомой. Тот факт, что более чем у 70% наших больных развились гипохромемия и эритропения, свидетельствует о тяжёлых нарушениях эритропоэза, костного мозга и эритроцитов.

Часто сообщается о снижении гематокрита у больных раком собак. Выявлена положительная корреляция между более низкими значениями гематокрита и стадией злокачественности [5]. Подобные результаты ожидаются и с учётом влияния эритроцитов на значения гематокрита. Развивающиеся анемия и эритропения неизбежно приводят к пропорциональной степени снижения гематокрита.

Тромбоцитопения у людей и животных с опухолевыми заболеваниями была описана в связи с химиотерапией. Однако больше чем в 36% случаев у собак с опухолями тромбоцитопения наблюдалась до начала химиотерапии [3]. Паранео-пластическая тромбоцитопения особенно специфична для сосудистых опухолей селезёнки (гемангиосаркома) и лимфопролиферативных опухолей (лимфома и лейкемия) [19; 3]. Доказано, что механизм тромбоцитопенического паранеопластического синдрома включает усиленную деструкцию тромбоцитов в сочетании с вторичным снижением их функций из-за прямого повреждения костного мозга и снижения его продуцирующего потенциала [3]. Кроме того, некоторые исследователи описали также аутоиммунно-опосредованную паранеопластическую тромбоцитопению [21; 9].

Нейтрофильный лейкоцитоз часто наблюдается у собак с различными новообразованиями. Лейкоцитоз с нейтрофилией развивается у большинства животных как ответ на воспалительно-некротические изменения в поражённых органах и тканевой распад опухолевой массы [1]. Механизмы паранеопластической лейкоцитарной реакции до конца не выяснены, но, вероятно, связаны с продукцией гемопоэтических факторов роста, т. е. гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), которые усиливают синтез и высвобождение нейтрофилов. В соответствии с этими фактами Petterino et al. [18] сообщали о случае с выделяемыми опухолью Г-КСФ и ГМ-КСФ у собаки с карциномой почки. Выделяемый опухолью Г-КСФ был также обнаружен у кошек с аденокарциномой кожи и плоскоклеточным раком лёгких [6]. Некоторые цитокины — интерлейкин-1 и фактор некроза опухоли альфа — также могут вызывать нейтрофилию, способствуя синтезу факторов роста [7]. Эти механизмы развития опухолеассоциированного лейкоцитоза могут объяснить два относительно частых феномена в онкологии: гиперлейкоцитоз (23,8% пациентов в этом исследовании) с одной стороны и невозможность контролировать эту лейкоцитарную реакцию антибиотиками с другой.

О лимфопении, наблюдаемой в этом исследовании, также сообщалось в других исследованиях собак с гемангиосаркомой селезёнки [2]. Хотя определённую причину этого состояния предположить невозможно, мы согласны с мнением Kritsepi-Konstantinou & Oikonomidis [13], что лимфопения, наблюдаемая у онкологических больных, обусловлена эндогенным стрессом и влиянием провоспалительных цитокинов и индуцирует конкурентное переключение миелопоэза на синтез гранулоцитов (нейтрофилов).

Изменение количества эозинофилов редко обсуждалось в ветеринарной онкологии. У наших пациентов эозинопения выявлена у 38,31% собак с гемангиосаркомой селезёнки. В большинстве отчётов об исследованиях изменений количества эозинофилов паранеопластическая эозинофилия наблюдалась при тучноклеточных опухолях, перикардиальной лейомиосаркоме, Т-клеточной кишечной лимфоме, анапластической карциноме молочной железы, фибросаркоме и др. [16]. Имеются единичные сообщения об опухолезависимой эозинопении при опухолях надпочечников [20]. Поскольку основной механизм развития эозинопении связан с высокими концентрациями глюкокортикоидов, можно предположить, что причиной этого процесса был стресс, спровоцированный злокачественным новообразованием [13].

Заключение

Паранеопластические гематологические изменения часто встречаются при различных видах новообразований, в том числе при гемангиосаркоме селезёнки. Анемия (гипохромемия с эритропенией), тромбоцитопения, нейтрофильный лейкоцитоз, лимфопения и эозинопения оказались важными гематологическими изменениями, связанными с гемангиосаркомой селезёнки. Отличительной особенностью этих злокачественных новообразований является тип анемии — микроцитарная гипохромная и нерегенеративная.

Литература

1. Ahlyum, M., E. Lee, A. Kim, E. Lee, I. Hong & K. Jeong, 2011. Canine hemangiosarcoma in a female Jindo dog. Laboratory Animal Research, 27, 361–363.
2. Aoki, T., H. Sunahara, K. Sugimoto, T. Ito, E. Kanai, S. Neo, Y. Fujii & Y. Wakao, 2015. Dynamic left ventricular outflow tract obstruction secondary to hypovolemia in a German Shepard dog with splenic hemangiosarcoma. Journal of Veterinary Medical Science, 77, 1187–1190.
3. Bergman, P. J., 2007. Paraneoplastic syndromes. In: Withrow and Macewen’s Small Animal Clinical Oncology, 4th edn, ed David Vail, Elsevier Incorporation, St. Louis, pp. 77–94.
4. Caro, J. J., M. Salas, A. Ward & G. Goss, 2001. Anemia as an independent prognostic factor for survival in patients with cancer: A systemic, quantitative review. Cancer, 91, 2214–2221.
5. Da Silva, A., D. Da Silva, C. Ribas, R. Dittrich, P. Dornbusch & S. Guerios, 2014. No hemograma de cadelas com neoplasia mamaria. Ciencia Animal Brasileira, 15, 87–92.
6. Dole, R. S., C. M. MacPhail & M. R. Lappin, 2004. Paraneoplastic leukocytosis with mature neutrophilia in a cat with pulmonary squamous cell carcinoma. Journal of Feline Medicine & Surgery, 6, 391–395.
7. Duda, N. B., S. F. Valle, J. P. Matheus, N. C. Angeli, L. C. Vieira, L. O. Oliveira, L. Sonne & F. D. Gonzalez, 2017. Paraneoplastic hematological, biochemical, and hemostatic abnormalities in female dogs with mammary neoplasms. Pesquisa Veterinaria Brasileira, 37, 479–484.
8. Dzhurov, A., E. Alexandrova & M. Alexandrov, 1989. Techniques for Histopathological Examination. Zemizdat, Sofia, pp. 28–34 (BG).
9. Finora, K., 2003. Common paraneoplastic syndromes. Clinical Techniques in Small Animal Practice, 18, 123–126.
10. Grotto, H. Z., 2008. Anaemia of cancer: An overview of mechanisms involved in its pathogenesis. Medical Oncology, 25, 12–21.
11. Karabagli, G., O. Duzgun, E. Yildar, O. Erdogan & A. Gurel, 2011. A hemangiosarcoma case in a dog. Journal of Faculty of Veterinary Medicine, Istanbul University, 37, 161–165.
12. Kent, M. S., J. H. Burton, G. Dank, D. L. Bannasch & R. B. Rebhun, 2018. Association of cancer-related mortality, age and gonadectomy in golden retriever dogs at a veterinary academic center (1989–2016). PLoS ONE, 13, e0192578.
13. Kritsepi-Konstantinou, M. & I. L. Oikonomidis, 2016. The interpretation of leukogram in dog and cat. Hellenic Journal of Companion Animal Medicine, 5, 62–68.
14. Lana, S., L. U’ren, S. Plaza, R. Elmslie, D. Gustafson, P. Morley, S. Dow, 2007. Continuous low-dose oral chemotherapy for adjuvant therapy of splenic hemangiosarcoma in dogs. Journal of Veterinary Internal Medicine, 21, 764–769.
15. Madewell, B. R. & B. F. Feldman, 1980. Characterization of anemias associated with neoplasia in small animals. Journal of the American Veterinary Medical Association, 176, 419–425.
16. Musser, M., E. Berger, H. A. Flaherty, L. Fox & C. M. Johannes, 2018. Marked paraneoplastic hypereosinophilia associated with a low-grade, metastatic canine mast cell tumour. Veterinary Record Case Reports, 6, e000563.
17. Neiger, R., J. Hadley & D. U. Pfeiffer, 2002. Differentiation of dogs with regenerative and non-regenerative anaemia on the basis of their red cell distribution width and mean corpuscular volume. The Veterinary Record, 150, 431–434.
18. Petterino, C., E. Luzio, L. Baracchini, A. Ferrari & A. Ratto, 2011. Paraneoplastic leukocytosis in a dog with a renal carcinoma. Veterinary Clinical Pathology, 40, 89–94.
19. Pintar, J., E. B. Breitschwerdt, E. M. Hardie & K. A. Spaulding, 2003. Acute nontraumatic hemoabdomen in the dog: A retrospective analysis of 39 cases (1987–2001). Journal of the American Animal Hospital Association, 39, 518–522.
20. Ramsey, I. & J. Ristic, 2007. Diagnosis of canine hyperadrenocorticism. In Practice, 29, 446–454.
21. Rozanski, E. A., M. B. Callan, D. Hughes & N. Sanders, 2002. Comparison of platelet count recovery with use of vincristine and prednisone or prednisone alone for treatment for severe immune-mediated thrombocytopenia in dogs., Journal of the American Veterinary Medical Association, 220, 477–481.
22. Thamm, D. H., 2007. Miscellaneous tumors. In: Withrow and Macewen’s Small Animal Clinical Oncology, 4th edn, ed David Vail, Elsevier Incorporation, St. Louis, pp. 785–795.

Источник: Bulgarian Journal of Veterinary Medicine, 2022, 25, No 2, 255–261. ISSN 1311–1477; DOI: 10.15547/bjvm.2020–0064. The BJVM operates under Creative Commons License BY-NC-ND 4.0.

СВМ № 4/2023

Вам также могут быть интересны статьи:

Гистиоцитарная саркома собак

Количественная морфометрия как прогностический метод при спонтанной сквамозно-клеточной карциноме кошек

Ретроспективное исследование опухолей семенников у собак: 332 случая (2010–2019)