Применение плазмы, обогащённой тромбоцитами, при лечении повреждения сухожилия глубокого сгибателя пальца лошади

Миломир Ковач, Михаил Сучков, Руслан Алиев, Татьяна Виноградова, ветеринарная клиника «Новый Век», Москва

 


Повреждения сухожилий (тендиниты) и связок (десмоидиты) являются самыми частыми причинами хромоты лошадей [1]. В 60% случаев всех тендинитов у лошадей происходит повреждение сухожилия поверхностного сгибателя пальца, в 35% — средней межкостной мышцы (поддерживающей связки), в 3% случаев — сухожилия глубокого сгибателя пальца, а на повреждение всех остальных сухожилий приходится не более 2% [2].

Существует множество методов лечения повреждений сухожилий у лошадей (физиотерапевтических, медикаментозных и хирургических) [3]. Инновационными методами лечения тендинитов являются регенеративные и генетические методы [4, 5]. Регенеративное лечение — это новая, активно развивающаяся область в медицине лошадей. Суть его заключается в стимуляции восстановления повреждённых сухожилий с помощью клеток, взятых из организма лошади (аутологичных клеток). Аутологичные клетки не отторгаются организмом после введения, поскольку распознаются его защитными системами как собственные [6]. Регенеративные методы лечения повреждения сухожилий предполагают использование костного мозга лошадей, применение стволовых клеток (выращенных из костного мозга и жировой ткани), а также применение плазмы, обогащённой тромбоцитами [3].

В этой статье приведены собственные клинические наблюдения и результаты лечения с помощью обогащённой тромбоцитами плазмы при редком повреждении сухожилия глубокого сгибателя пальца у лошади.


 

 

Клинический случай применения обогащённой тромбоцитами плазмы

Пациент – спортивная лошадь тракененской породы (возраст 10 лет), очень успешно выступающая в троеборье.

История болезни: хромота в течение года на левую тазовую конечность. Предварительный диагноз ветеринарного врача в конюшне, где содержалась лошадь, — «тендовагинит путового сухожильного влагалища». Проводимое лечение (местное и системное введение гиалуроновой кислоты и ударно-волновая терапия) было безуспешным.

При клиническом исследовании в ветеринарной клинике «Новый Век» было выявлено: умеренный отёк путового сухожильного влагалища, хромота 2/5 (классификация AAEP), диагностическая анестезия пальмарных пальцевых нервов на уровне путового сустава (средняя пальцевая пальмарная анестезия) — положительная. При рентгенологическом исследовании путовой области клинически значимой патологии не выявлено. В результате ультразвукового исследования было обнаружено: краевой дефект 2-й степени сухожилия глубокого сгибателя пальца левой тазовой конечности в зоне 4С (на уровне путового сустава) — анэхогенная структура размером 0,5 кв. см (рис. 1). Вследствие повреждения сухожилия произошло развитие хронического тендовагинита путового сухожильного влагалища с выраженным утолщением плантарной связки с околосухожильным (паратендиальным) отёком.
 

Рис. 1.
Повреждение сухожилия глубокого сгибателя пальца лошади на ультразвуковом снимке.

 

По согласованию с владельцем лошади проведено хирургическое вмешательство, в ходе которого под общей анестезией рассекли круговую плантарную связку закрытым способом (т.е. без вскрытия сухожильного влагалища) по методу Никсона [7]. Целью данного хирургического вмешательства являлось уменьшение давления круговой плантарной связки на сухожилие сгибателя пальца и обеспечение лучшей циркуляции синовиальной жидкости путового сухожильного влагалища. После хирургического вмешательства в место повреждения сухожилия была введена плазма, обогащённая тромбоцитами.

Обогащённая тромбоцитами плазма была получена с помощью набора Osteokine (Orthogen Veterinary GmbH, Германия) по следующей методике.

Периферическая кровь лошади (60 мл) была взята в пробирку с цитратом (6 мл). Затем кровь в асептических условиях перенесли в специальную наборную пробирку (рис. 2). После первого центрифугирования (3 мин. при 900 об./мин.) из цельной крови специальным наборным устройством асептически удалили эритроциты и лейкоциты (тромбоциты при этом остались в надосадке). После этого проводилось второе центрифугирование (10 мин. при 1500 об./мин.) (рис. 2). Затем в асептических условиях из надосадка собрали плазму, обогащённую тромбоцитами, в стерильный шприц. При этом концентрация тромбоцитов составила более 1000×103/мкл. Напомним, в норме в крови концентрация тромбоцитов составляет 150–350×103/мкл.
 

Рис. 2. Наборная пробирка Osteokine с плазмой крови после второго центрифугирования.

 

После этого обогащённую тромбоцитами плазму (2 мл) ввели асептическим путём под ультразвуковым контролем непосредственно в повреждённое сухожилие глубокого сгибателя пальца тазовой конечности (рис. 3).
 

Рис. 3. Введение обогащённой тромбоцитами плазмы под ультразвуковым контролем непосредственно в повреждённое сухожилие глубокого сгибателя пальца лошади под наркозом.

 

Лошадь хорошо перенесла операцию и общую анестезию. В реабилитационный период была проведена антибактериальная и противовоспалительная терапия. Назначено шаговое движение в течение 3 месяцев.

На повторном осмотре через 3 месяца лошадь не показывала признаков хромоты при движении шагом и рысью. При ультразвуковом исследовании сухожилия глубокого сгибателя пальца была выявлена активная фаза заживления.

 

Обсуждение

Повреждение сухожилия глубокого сгибателя пальца встречается у лошадей редко. Прежде всего повреждение этого сухожилия происходит на уровне и ниже путового сустава [3]. Тендинит глубокого сгибателя пальца почти всегда вызывает высокую степень хромоты (более высокую степень, чем при повреждении поверхностного сгибателя пальца). Данное повреждение сопровождается воспалением сухожильного влагалища и по причине локализации на уровне путового сустава (выраженная подвижность и нагрузка на сухожилие) тяжело поддаётся заживлению вне зависимости от применённых методов лечения [8]. Также часто (более 56% случаев) происходит рецидив заболевания (повторное повреждение), так как заживление сухожилия сопровождается формированием соединительнотканного рубца с высокой концентрацией коллагена III типа, который имеет меньшую прочность и эластичность по сравнению с коллагеном I типа (который является основным коллагеном здорового сухожилия) [9].

По этой причине заживление сухожилия, в зависимости от степени повреждения, длится не менее 3 месяцев (иногда до 6–9 месяцев). Заживление сухожилия зависит от применяемого метода лечения. Считается, что регенеративные методы лечения (применение стволовых клеток и обогащённой тромбоцитами плазмы) не сокращают время заживления, а значительно усиливают прочность этого сухожилия, т.е. уменьшают процент повторного повреждения [10].

Наши предварительные результаты (клиническое и ультразвуковое исследования) показывают, что применение обогащённой тромбоцитами плазмы способствует заживлению сухожилия глубокого сгибателя пальца. В отечественной ветеринарной медицине для лечения лошадей эта методика была применена впервые. Для получения достоверных данных об эффективности данной методики необходимо провести исследования с большим количеством животных и с периодом наблюдения в течение длительного времени.

Применение обогащённой тромбоцитами плазмы является одним из новых методов лечения повреждения сухожилий лошади. Впервые в мире эту методику применили в 2007 году [11]. Плазму, обогащённую тромбоцитами, успешно используют и при повреждениях других органов и тканей у лошадей. В тромбоцитах, как известно, находится большое число факторов роста, благоприятствующих заживлению сухожилия: тромбоцитарный фактор роста (регулирует синтез белков и ДНК в месте травмы, экспрессию других факторов роста), трансформирующий фактор роста (активирует клеточную миграцию, экспрессию протеиназы, связывающую способность фибронектина, ускоряет завершающий этап клеточной пролиферации, стимулирует выработку коллагена), инсулиноподобный фактор роста (активирует пролиферацию и миграцию клеток, стимулирует формирование межклеточного вещества ), эндотелиальный фактор роста (стимулирует пролиферацию и дифференциацию эндотелиальных клеток), интерлейкин-8, CTGF-фактор, остеокальцин, витронектин, тромбоспондин и эпидермальный фактор роста [12].

По результатам нескольких зарубежных исследований, после применения обогащённой тромбоцитами плазмы улучшение заживления повреждённого сухожилия зафиксировано в более чем 80% случаев [13, 14]. По данным новых исследований, результативность лечения серьёзных травм сухожилий значительно повышается, если в повреждённую ткань одновременно вводятся и стволовые клетки, и обогащённая тромбоцитами плазма [15, 16]. Показатель излечения в таком случае достигает 90% в сравнении с монотерапией [17].

 


Список литературы

1. Gaschen L, Burba DJ: Musculoskeletal injury in thoroughbred racehorses: correlation of findings using multiple imaging modalities. Vet Clin North Am Equine Pract. 2012, 28 (3): 539–61.

2. Kovac M., Nowak M., Tambur Z. Frequency of orthopedic diseases in horses: A retrospective study. Vet Glasnik, 2002, 56, 5-6, 307–319.

3. Kovac M.: Ортопедические заболевания лошадей — современные методы диагностики и лечения. Изд. «Королевский издательский дом». 2013, 209–224.

4. Fortier LA.: Making progress in the what, when and where of regenerative medicine for our equine patients. Equine Vet J. 2012, 44 (5): 511–2.

5. Alves AG, Stewart AA, Dudhia J.: Cell-based therapies for tendon and ligament injuries.

Vet Clin North Am Equine Pract. 2011, 7 (2): 315–33.

6. Smith RK, Werling NJ: Beneficial effects of autologous bone marrow-derived mesenchymal stem cells in naturally occurring tendinopathy. PLoS One. 2013, 25; 8, 9.

7. Nixon A.: Phalanges and the metacarpophalangeal joint. In Auer J. Stick J.: Equine Surgery.3.ed. Sounders, 2006, 1217–1285.

8. Dyson S, Murray R, Schramme M.: Lameness in 46 horses associated with deep digital flexor tendonitis in the digit: diagnosis confirmed with magnetic resonance imaging. Equine Vet J., 2003 Nov;35(7):681–90.

9. Voleti PB, Buckley MR.: Tendon healing: repair and regeneration. Annu Rev Biomed Eng. 2012;14:47–71.

10. Godwin EE, Young NJ.: Implantation of bone marrow-derived mesenchymal stem cells demonstrates improved outcome in horses with overstrain injury of the superficial digital flexor tendon. Equine Vet J. 2012, 44(1):25–32.

11. Schnabel LV, Mohammed HO.: Platelet rich plasma (PRP) enhances anabolic gene expression patterns in flexor digitorum superficialis tendons. J Orthop Res. 2007, 25(2):230–40.

12. Yuan T, Zhang CQ, Wang JH. Augmenting tendon and ligament repair with platelet-rich plasma (PRP). Muscles Ligaments Tendons J. 2013, (3):139–149. Review.

13. Bosch G, Moleman M.: The effect of platelet-rich plasma on the neovascularization of surgically created equine superficial digital flexor tendon lesions. Scand J Med Sci Sports. 2011, (4):554–61.

14. Bosch G, van Schie HT.: Effects of platelet-rich plasma on the quality of repair of mechanically induced core lesions in equine superficial digital flexor tendons: A placebo-controlled experimental study. J Orthop Res. 2010,28(2):211–7.

15. Carvalho AD, Badial PR.: Equine tendonitis therapy using mesenchymal stem cells and platelet concentrates: a randomized controlled trial. Stem Cell Res Ther. 2013, 22;4(4):85

16. Del Bue M, Ricco` S.: Equine adipose-tissue derived mesenchymal stem cells and platelet concentrates: their association in vitro and in vivo. Vet Res Commun. 2008, 1:S51–5.

17. Ricco` S, Renzi S.: Allogeneic adipose tissue-derived mesenchymal stem cells in combination with platelet rich plasma are safe and effective in the therapy of superficial digital flexor tendonitis in the horse. Int J Immunopathol Pharmacol. 2013, 26(1 Suppl):61–8.


 

СВМ № 1/2014

Оценить материал
Нравится
Нравится Поздравляю Сочувствую Возмутительно Смешно Задумался Нет слов

Добавить комментарий

Войти с помощью: 

Подписка на новости

После отправки заполненной формы Вам на почту придёт письмо со ссылкой для подтверждения рассылки. Если Вы не видите письма, проверьте папку «Спам». Если не подтвердить рассылку, мы не сможем отправлять её Вам.






Нажимая на кнопку «Подписаться», я даю согласие на обработку персональных данных
Я ознакомлен с политикой конфиденциальности

Close