Септический шок, связанный с комплексной инфекцией зоба, вызванной Candida и бактериями, у двух синелобых амазонов. Клинический случай

E. Lee^1‘2, A. Kim^1‘2, E. Lee^1‘2, S. Park¹, K. Jeong^1‘2
1College of Veterinary Medicine, Kyungpook National University, Daegu City, Republic of Korea
²Stem Cell Therapeutic Research Institute, Kyungpook National University, Daegu City, Republic of Korea 

Список сокращений:
СИТЕС — Конвенция о международной торговле видами дикой фауны и флоры, находящимися под угрозой исчезновения (Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora, CITES), E. coli — Escherichia coli, GMSN — Gomori’s methenamine silver nitrate, ГЭ — гематоксилин-эозин, ШИК — шифф-йодная кислота

Инфекционные заболевания, включая те, которые вызываются бактериями, грибами и вирусами, являются причиной значительных экономических потерь в отношении различных видов птиц. Клинически важные бактериальные патогены включают виды Alcaligenes/Bordetella, Campylobacter, Clostridium, Erysipelothrix, Escherichia coli (E. coli), Haemophilus, Listeria, Mycobacterium, Pasteurella, Pseudomonas, Aeromonas, Salmonella, Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, и Yersinia [Gerlach 1994]. Распространённые грибковые заболевания включают кандидоз, аспергиллёз и криптококкоз [Gerlach 1994]. Для контроля этих инфекционных заболеваний птиц важно профилактировать и лечить не только первичную инфекцию, но и возможную передачу другим животным, а также рецидивы, устанавливая точные диагнозы, особенно для птиц, находящихся под угрозой исчезновения, таких, как виды, упомянутые в Конвенции о международной торговле видами дикой фауны и флоры, находящимися под угрозой исчезновения (СИТЕС).

Синелобый амазон (Amazona aestiva) занесён в Приложение II СИТЕС согласно корейскому законодательству, но не включён в СИТЕС по европейскому закону (Постановление комиссии ЕС). СИТЕС является международным соглашением, цель которого – быть уверенными в том, что международная торговля дикими животными и растениями не угрожает сохранению видов. Приложение I включает виды, находящиеся на грани исчезновения. Торговля образцами этих видов разрешается только в исключительных обстоятельствах. Приложение II содержит виды, не обязательно находящиеся под угрозой исчезновения, но для которых торговля должна находиться под контролем, чтобы предотвратить использование, несовместимое с их сохранением.

Разбор клинического случая

Два синелобых амазона (Amazona aestiva) были ввезены в Корею, через несколько дней после смены корма у них началась сильная потеря веса (с 350 до 220 г), изнурение, слабость и диарея. Радиография выявила расширение зоба и кишечника и системное нарушение кровообращения. Многочисленные дрожжи (Candida spp.) были обнаружены при цитологическом исследовании слизистой оболочки зоба. Один попугай погиб спустя несколько часов, другой – несколько дней после медицинского обследования, посмертная диагностика для определения причины смерти каждого животного была проведена в Департаменте ветеринарной патологии Национального университета Кёнгбук.

Было проведено патологоанатомическое вскрытие, паренхиматозные органы собраны и зафиксированы 10% нейтральным буферным раствором формалина (DC Chemical Co., Корея) для гистопатологического исследования. Образцы тканей были приготовлены с использованием стандартных методов, заполнены парафином, после чего были сделаны срезы толщиной 4 µм. Препараты были депарафинизированы толуолом (Duksan Pure Chemical, Корея) и обезвожены серией ступенчатого спиртования. Было проведено окрашивание гематоксилин-эозином (ГЭ), шифф-йодной кислотой (ШИК), метенамин-серебряным нитратом по Гомори (ГМСН) и по Граму.

У первого попугая макроскопическое исследование выявило тяжёлую кахексию и истончение кожи. Следы диареи наблюдались вокруг клоаки (изображение 1А), в пищеводе присутствовали рвотные массы. В целомической полости содержалось в заметном количестве жёлтое фибринозное вещество. Зоб содержал творожистые поражения в виде белого слоя, выстилающего слизистую оболочку (изображение 1B).

На печени и селезёнке наблюдались патологические очаги белого цвета (изображение 1C, D). Почки были дряблыми и имели выраженную зелёную окраску. При микроскопическом исследовании выявлены изъязвления слизистой оболочки зоба, содержащие гифы и споры грибов (Candida spp.), а также колонии бактерий в изъязвлённых участках. Тяжёлая грибковая инфекция была подтверждена с помощью методов окрашивания ШИК и ГМНС, при окрашивании по Граму были выявлены грам-отрицательные палочки (рис. 2).

Палочкообразные грам-отрицательные бактерии также наблюдались в фибринозном содержимом, в значительном количестве присутствовавшем в камерах сердца (изображение 3A-C). Наблюдалось отторжение эпителия трахеи от базальной мембраны, эпителиальные клетки, в основном, отсутствовали. Хрящевые кольца трахеи были минерализированы. Паренхима лёгких содержала значительное количество узелковых утолщений, состоящих из воспалительных клеток и бактерий. В интерстициальной ткани лёгких присутствовали скопления макрофагов, поглотивших грам-отрицательные палочки (изображение 3D, E). Альвеолярные капилляры были наполнены, присутствовали лёгочные геморрагии. Как и в лёгких, маленькие узелковые утолщения из макрофагов и бактерий присутствовали в паренхиме печени (изображение 3F, G).

Палочкообразные бактерии также наблюдались внутри печёночных вен. Гепатоциты были некротизированы и лизированы (изображение 4A–C). В селезёнке выявлены апоптоз, проявившийся в виде картины «звёздного неба», и некроз. Клетки трубчатого эпителия почек были лизированы, присутствовали пенистые макрофаги (изображение 4F, G). Кератиновый слой мускульного желудка в некоторых участках отсутствовал. В слизистом желудке и тонком кишечнике значительная часть железистых эпителиальных клеток была лизирована.

У второго попугая при вскрытии обнаружены следы рвоты вокруг рта и следы диареи вокруг клоаки. Зоб содержал редкие творожистые поражения, геморрагические поражения наблюдались на протяжении всего пищеварительного тракта (зоб, железистый и мускульный желудки, кишечник). В частности, в тонком отделе кишечника были отмечены сильные петехиальные геморрагии и истончение. Селезёнка была дряблая и бледная, на мезентериальных лимфатических узлах видны геморрагии. Гистопатологически выявлены дегенеративные изменения эпителия зоба и обнаружены гифы и споры грибов (Candida spp.), а также колонии бактерий. Грибковая инфекция подтверждена ШИК-окрашиванием (изображение 5A–C). Слизистая оболочка пищеварительного тракта, включая слизистую железистого и мускульного желудков, тонкого и толстого кишечника, была в значительной степени отслоившаяся и лизированная (изображение 5D–G).

В кишечнике отмечены дилятация кровеносных сосудов и средней степени кровоизлияния. Инфильтрация плазменными клетками и лимфоцитами наблюдались в собственной пластинке слизистой оболочки кишечника. Паренхиматозные органы, включая печень, селезёнку и почки, содержали некротические и / или апоптотические поражения (изображение 6A–F). Паренхима лёгких была набухшая, альвеолярные капилляры значительно наполнены (изображение 6G, H). Трахеальные хрящи были минерализированы, дегенерированы и содержали геморрагии. 

Обсуждение и выводы

Грибковые инфекции довольно распространены у птиц, к ним относятся аспергилёз, кандидоз, дактилариоз, криптококкоз, парша, родоторулёз, торулёз, мукормикоз и гистоплазмоз. Среди этих болезней самой значимой для птиц является кандидоз [Hubalek 1978; Dhama et al. 2013].

Кандидоз вызывается грибами рода Candida, который включает приблизительно 200 видов. Среди них наиболее часто встречающимся и клинически значимым является C. albicans [Odd 1994; Dhama et al. 2013]. Хотя виды рода Candida являются нормальной составляющей флоры желудочно-кишечного тракта, чрезмерный рост грибов и заболевание могут возникать у пациентов при наличии различных факторов риска, которые подавляют иммунную систему макроорганизма, включая недостаточное питание, дефицит витамина D, плохую гигиену, длительное применение антибиотиков, которые подавляют нормальную бактериальную флору, и стресс. В описываемом случае попугаи были импортированы из-за границы, их питание поменялось за несколько дней до смерти. Мы полагаем, что длительное путешествие и внезапная смена корма стали стресс-факторами, которые ослабили иммунную систему и вызвали чрезмерный рост Candida. 

У инфицированных птиц наблюдаются плохой рост, депрессия, анорексия, диарея и дегидратация, у птиц, поражённых в значительной степени, это может приводить к смертельному исходу [O’Meara and Witter 1971; Bauck 1994; Chute 1997; Oglesby 1997; Velasko 2000; Dhama et al. 2013]. Обычно повреждения отмечаются в ограниченных участках верхнего отдела пищеварительного тракта. Происходит пролиферация грибов, они формируют гифы или псевдогифы на поверхности верхних отделов ЖКТ и захватывают эпителиальные слои. Это приводит к гиперплазии и образованию псевдомембран, что макроскопически проявляется в виде творожистых образований, обычно локализующихся в зобе [Mayeda 1961; Velasko 2000; Dhama et al. 2013]. Обычно наблюдаются образование псевдомембран на протяжении верхнего отдела пищеварительного тракта и эрозии слизистой оболочки в железистом и мышечном желудках наряду с воспалением кишечника [O’Meara and Witter 1971; Chute 1997; Bethea et al. 2010; Dhama et al. 2013]. У попугаев в двух рассматриваемых случаях выявлены кандидоз зоба и изъязвление с отслоением слизистого эпителия органов пищеварения. Бактериальная пролиферация присутствовала также в поражённом зобе. У одного из попугаев бактерии были обнаружены и в других органах, включая сердце, лёгкие и печень. Рост бактерий в зобе и последующая системная диссеминация, объясняют другие системные поражения, включая некроз, геморрагии и гиперемию паренхиматозных органов. Мы предполагаем, что чрезмерный рост и размножение Candida разрушили связи слизистого слоя и изменили микрофлору зоба, что позволило бактериям пролиферировать и распространиться в другие системные органы.

Грам-отрицательные палочки были обнаружены в обоих описываемых случаях. Среди известных патогенов птиц к грам-отрицательным палочкообразным бактериям относятся E. coli, Salmonella, Klebsiella, Yersinia, Pseudomonas, Aeromonas, Campylobacter, Vibrio, Pasteurella, Haemophilus, и Acinetobacter spp. Среди них пищеварительный тракт птиц поражают E. coli, Salmonella, Pseudomonas, Aeromonas, и Pasteurella; E. coli вызывает колисептицемию, которая проявляется острой апатичностью, анорексией, взъерошенным оперением, диареей, полиурией и потерей веса. Катаральный энтерит является частым, но неспецифичным поражением. E. coli может вызывать фиброзный полисерозит (преимущественно с образованием жёлтого фибрина) и появление серых очагов (гранулём) разного размера на печени, под серозной оболочкой кишечника, на селезёнке или почках, что обычно обнаруживается при вскрытии. Инфекция, вызванная E. coli, может также приводить к септицемии и смерти [Bauck 1994]. Хотя для специфической диагностики требуется выращивание и идентификация микроорганизмов из поражённых тканей, полисерозит и образование гранулём (серых очагов) в органах обычно говорят о наличии поражения E. coli.

У животных, погибших от септического шока, обычно наблюдаются признаки полостной болезни лёгких, пульмонарные отёки, петехиальные геморрагии, гиперемия печени и кишечника и дегидратация. Типичная микроскопическая картина поражений включает острый некроз почечных канальцев, центролобулярных гепатоцитов, сердечных миоцитов, адреналовых клеток и верхушек кишечных ворсинок [Ackermann 2006].

Основываясь на гистопатологической картине и клинических проявлениях болезни, мы предположили, что попугаи в описанных случаях погибли в результате сепсиса, возникшего вследствие сочетанной инфекции зоба, возбудителями которой стали Candida spp. и грам-отрицательные палочкообразные бактерии. Безусловно, профилактика лучше лечения, и эффективная профилактика и контроль являются лучшей стратегией почти для всех заболеваний. В разведении птиц профилактика необходима для исключения каких-либо факторов риска, таких как стресс, недостаточные питание и уход или иные заболевания.

Работа выполнена при поддержке Программы развития сельскохозяйственной биотехнологии Министерства продовольствия, сельского, лесного и рыбного хозяйства Республики Корея (грант № 312062-5).

Источник: Veterinarni Medicina, 61, 2016 (5): 288–294. Open Access Policy: this journal provides immediate open access to its content on the principle that making research freely available to the public supports a greater global exchange of knowledge.

 СВМ № 6/2016