Генетики упростили диагностику рака крови у домашних животных с помощью РНК-анализа

Т-клеточная лимфома является одной из наиболее распространённых опухолей у мелких домашних животных: у кошек лимфоидные новообразования составляют до трети всех случаев рака, а у собак на долю лимфом приходится от 7% до 24% всех злокачественных опухолей. Несмотря на высокую частоту встречаемости, существующие методы диагностики, такие как ПЦР-тесты на клональность (PARR), остаются медленными, дорогостоящими и не всегда точными. Исследователи из Кембриджского университета предложили новый метод диагностики, основанный на обнаружении РНК-транскриптов TRBC1 и TRBC2, который позволяет отличить доброкачественные скопления Т-клеток от злокачественных новообразований непосредственно в срезах тканей.

Целью данной работы была разработка и проверка эффективности диагностического теста для кошек и собак, аналогичного методу, недавно внедрённому в гуманной медицине. Учёные стремились подтвердить, что выявление монотипии (преобладания одного типа изотипа Т-клеточного рецептора) может служить надёжным маркером клональности Т-клеток, заменяя сложные молекулярные исследования.

Исследование проводилось на архивных образцах тканей, зафиксированных в формалине и залитых парафином. Всего было изучено 16 клинических образцов: 7 от кошек (2 лимфомы, 5 доброкачественных) и 9 от собак (2 лимфомы, 7 доброкачественных). Учёные сначала определили последовательности TRBC1 и TRBC2 у обоих видов, сосредоточившись на наиболее различающихся участках (3′ UTR), а затем разработали специфические зонды для РНК-гибридизации in situ (метод BaseScope). Результаты гибридизации сравнивались с данными количественной ПЦР (qPCR).

Подпишитесь прямо сейчас на наш телеграм-канал, чтобы следить за ветеринарными новостями.

Исследование подтвердило техническую осуществимость метода и выявило чёткие численные закономерности:

•  В нормальных тканях кошек и собак соотношение Т-клеток TRBC2+ к TRBC1+ составляет от 1:1 до 3:1, что соответствует показателям здорового организма.
• В случаях Т-клеточной лимфомы наблюдалась чёткая рестрикция (ограничение) одного из изотипов.
• У собаки породы золотистый ретривер с кожной лимфомой было выявлено преобладание TRBC1 с соотношением 5:1 (инверсия нормы).
• У бигля с лимфомой подчелюстного узла и у двух кошек (русская голубая и сиамская) была зафиксирована выраженная TRBC2-рестрикция.
•  Метод визуализации позволил отличить опухолевые клетки от окружающих их здоровых инфильтрирующих лимфоцитов, что невозможно при обычном ПЦР-исследовании.

По мнению исследователей, обнаружение транскриптов TRBC1/2 является перспективным суррогатным методом определения клональности Т-клеток. Практическая значимость заключается в том, что новый тест позволяет оценивать архитектуру ткани и морфологию клеток одновременно с молекулярным анализом, что повышает точность диагноза и исключает ложноположительные результаты при воспалительных процессах. Внедрение этого метода в клиническую практику может существенно сократить время ожидания результатов, снизить стоимость диагностики и сделать качественную ветеринарную помощь доступной для большего числа владельцев животных

Источник: mdpi.com