Учёные адаптировали метод ротового мазка для диагностики здоровья собак

Оценка благополучия и здоровья животных — приоритетная задача современной ветеринарии. Одним из перспективных инструментов для этого является анализ клеток слизистой оболочки рта на наличие так называемых «микроядер» (Буккальный микроядерный цитомный тест, БМЦТ). Это крошечные фрагменты в клетках, которые указывают на повреждения ДНК и могут служить ранним сигналом развития рака, преждевременного старения или воздействия токсинов. Хотя БМЦТ широко применяется в медицине человека, его использование в ветеринарии до сих пор было крайне ограниченным.

Подпишитесь прямо сейчас на наш телеграм-канал, чтобы следить за ветеринарными новостями.

Основной целью работы стала разработка и оптимизация протокола сбора и подготовки клеток буккального эпителия собак для выявления хромосомных аномалий (прежде всего микроядер) как биомаркеров генотоксичности.

Исследование проводилось на шести породистых суках (4 французских бульдога и 2 мопса) в возрасте от 1 до 4 лет. Клетки собирали путём осторожного соскоба со слизистой оболочки щёк и нёбно-язычной дуги с помощью зубной щётки средней жёёсткости в течение 15 секунд. После фиксации образцов клетки окрашивали по методу Фельгена для ядер и «светлым зелёным» для цитоплазмы. Анализ проводился с использованием комбинации световой и флуоресцентной микроскопии, что позволило минимизировать риск ложноположительных результатов. На каждый образец подсчитывали не менее 1000 клеток.

Авторы успешно адаптировали протокол для собак, введя дополнительные этапы очистки образцов от клеточного мусора. В среднем у обследованных животных было обнаружено:

• 3,2 микроядра на 1000 клеток;
• 2,7 двуядерных клеток и 1,5 ядерных почек на 1000 клеток;
• общая частота аномалий составила 0,73%.

Исследование показало, что частота микроядер у собак в три раза выше, чем у здоровых людей (3,2 против 1 на 1000 клеток). Кроме того, количество базальных клеток у молодых собак оказалось сопоставимо с уровнем, характерным для пожилых людей, что может отражать высокую митотическую активность и регенеративную способность слизистой оболочки у псовых.

Работа подтвердила техническую осуществимость и эффективность метода БМЦТ для ветеринарии собак. Он является малоинвазивным, недорогим и быстрым (результаты можно получить за 1–2 дня) по сравнению с традиционной гистологией. Исследователи рекомендуют использовать двойную проверку образцов (световая + флуоресцентная микроскопия) для подтверждения сложных аномалий. БМЦТ имеет большой потенциал в качестве биомаркера общего состояния здоровья, особенно когда забор крови затруднен из-за размера животного или стресса у него.

Источник: mdpi.com