Учёные разработали быстрый и высокочувствительный тест для диагностики парвовируса собак

Парвовирусная инфекция остаётся одной из наиболее тяжёлых вирусных болезней у собак, особенно у щенков. Для лечения критично важно поставить диагноз как можно раньше, однако лабораторные методы требуют наличия времени и оборудования. В новой работе исследовательская группа из Китая представила быстрый диагностический метод NMED — технологию ферментного распознавания несовпадений ДНК, объединённую с изотермической амплификацией и визуальной интерпретацией результата на тест-полоске. По мнению авторов, задача заключалась в создании инструмента, который можно применять в практике клиник и в полевых условиях без потери чувствительности и точности определения возбудителя парвовирусного энтерита у собак.

С целью обеспечения специфичности теста учёные подобрали набор праймеров для амплификации участка гена VP2 — ключевого структурного белка вируса — и протестировали работу нескольких вариантов флюоресцентных зондов. Полученная система уверенно различала парвовирус собак и не реагировала на другие распространённые вирусы, включая возбудителя чумы плотоядных, вирус парагриппа собак, аденовирус первого типа и коронавирус собак.

Подпишитесь прямо сейчас на наш телеграм-канал, чтобы следить за ветеринарными новостями.

На выполнение теста требуется около 50 минут, ещё примерно 10 минут занимает визуальное считывание результата на тест-полоске. По данным исследователей, метод обнаруживает вирусный материал в концентрациях выше 10 копий на микролитр, что соответствует высокой аналитической чувствительности для экспресс-диагностики.

Технологию проверили и на клинических образцах — 35 пробах фекалий, ранее положительных в клинических экспресс-тестах. Совпадение результата с результатами исследования в полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (который является лабораторным стандартом для выявления вирусов) составило 97,14%. Согласованность с коммерческими тестами на основе иммунохроматографии оказалась ниже, что авторы связывают с большей чувствительностью новой технологии в отношении низких концентраций вируса.

Исследователи отмечают, что сочетание изотермической амплификации и ферментного распознавания несовпадений снижает вероятность получения ложноположительных результатов — проблему, характерную для некоторых других изотермических методик. По мнению авторов, технология NMED может быть адаптирована и для выявления других парвовирусов, включая панлейкопению кошек и цирковирус свиней, что расширит применение этой технологии в ветеринарной диагностике.

Источник: frontiersin.org