Заболевания, вызванные сиблированием протеинов базальной мембраны
Ш. Ривьер, T. Oливри
В этой части рассматриваются аутоиммунные дерматозы у собаки и кошки, возникающие при патологических процессах, связанных с повреждениями протеинов базальной мембраны.
Уже более 25 лет в литературе по ветеринарной медицине пишут о буллезных заболеваниях у собаки. Однако несмотря на клиническое и прогностическое отличие, до настоящего времени их группировали под названием «буллезный пемфигоид» (S.D. White et coll., 1984; G. Kunkle et col., 1978; C.E. Griffin, J.M. Mac Donald, 1981; V.A. Fadok, H.E. Janney, 1982; G.N. Thurnvald et coll., 1981). Персистенция маленьких и больших пузырьков (булл) и изъязвлений, выявляемых методом гистоморфологического исследования (расслоение на уровне дермоэпидермального сочленения), а также формирование депо иммуноглобулинов (IgG) по всей протяженности базальной мембраны, идентифицируемых методом прямой иммунофлуоресценции, являются достаточно веским аргументом в пользу данного заболевания. Тем не менее, природа самой мишени, в отношении которой формируются аутоантитела, установлена не была.
Базальная зона представлена множеством интра- и экстрацеллюлярных протеинов, обеспечивающих соединение на уровне эпидермального и дермального слоев кожного покрова (рис. 1). Установлено, что у человека разные протеины, становясь мишенью по отношению к формирующимся аутоантителам, дают возможность различать заболевания, которые проявляются в форме буллезного пемфигоида. Благодаря использованию «точечного» метода иммунологического исследования на сегодняшний день становится возможным проведение прямой идентификации аутоантигенов, ответственных за то или иное заболевание. На основании исследований, проведенных за последние годы показано, что многие буллезные заболевания у человека эквивалентны таковым у собаки и кошки.
Цель данной статьи заключается в расширении нашего представления об аутоиммунных дерматозах у собак и кошек, вызванных повреждением белков базальной мембраны кожного покрова.
1. Буллезный пемфигоид
1.1. Общие сведения
Термин буллезный пемфигоид ограничивается заболеванием, для которого характерны следующие признаки:
1 — наличие пузырьков или булл (более крупных пузырьков) с высоким тургором;
2 — отслоение на субэпидермальном уровне, где при гистоморфологическом исследовании отмечают наличие эозинофилов или интравезикулярных нейтрофилов;
3 — присутствие антител, направленных против NC16A, то есть части коллагена XVII (рис. 2), называемого ВРАG2 (180Кd) и/или значительно реже — эпидермальным протеином, относящимся к разряду пластинчатых ВРАG1 (230Кd ) (рис. 1).
Это заболевание, которое на протяжении нескольких лет тщательно изучали у человека, и на сегодняшний день оно очень хорошо детализировано. Но у собаки этим вопросом занимаются лишь с 1995 года (T. Iwasaki et coll., 1981). Недавно буллезный пемфигоид также был описан и у кошек (T. Olivrу et coll., 1999).
У человека буллезная форма пемфигоида встречается намного чаще (J.R. Stanley, 1999), в основном у женщин в возрасте старше 60 лет (J.R. Stanley, 1999). У собаки и кошки недостаточное число случаев данного заболевания не имеет статистической достоверности, но оно, вероятно, затрагивает и молодых взрослых особей (T. Iwasaki et coll., 1995; T. Olivrу et coll., 1999).
1.2. Клиническая картина
У человека буллезный пемфигоид клинически характеризуется наличием тургересцентных1 пузырьков или изъязвлений, повреждающих слизистую (в основном полость рта), кожно-слизистое соединение и кожный покров (в основном в области трущихся поверхностей) (T. Iwasaki et coll., 1981).
1Тургесценция (лат. turgescere, надуваться) [англ. turgescence]. Увеличение объема ткани или органа, провоцируемого приливом крови.
При этом виде дерматоза у собаки и кошки мы также обнаруживаем наличие тургесцентных пузырьков, эрозий и корочек. У собаки повреждения часто группируются и проявляются в вестибулярной части наружного слухового прохода (фото 1), а также в области живота, в ямках подмышек и на уровне кожно-слизистого соединения (фото 2). У кошки отмечают небольшое количество повреждений, которые в основном присутствуют на голове и в полости рта (губы, мягкое небо) (T. Iwasaki et coll., 1981; T. Olivry et coll., 1999, 2001).
1.3. Гистоморфологическая картина
У человека, собаки и кошки методом гистоморфологического исследования выявлено отслоение на уровне дермо-эпидермального сочленения с присутствием эозинофилов (фото 3 и 4) (T. Iwasaki et coll., 1981; T. Olivry et coll., 1999, 2001).
1.4. Иммунологическая и патогенетическая картина
Линейное депо IgG и фракцию комплемента С3 постоянно выявляли у человека и собаки методом прямой иммунофлуоресценции (T. Iwasaki et coll., 1981). У кошки выраженное депо IgG персистирует по всей протяженности базальной мембраны.
У человека при проведении метода непрямой иммунофлуоресценции позитивную реакцию отмечают примерно в 70% случаев (T. Iwasaki et coll., 1995). Что касается кошки и собаки, то в настоящее время, ввиду незначительного количества проведенных исследований, такие данные отсутствуют. Однако отмечено, что при проведении метода иммунофлуоресцентного исследования преобладает позитивная реакция (фото 5) (T. Iwasaki et coll., 1981; T. Olivry et coll., 1999).
У трех представителей класса млекопитающих, о которых говорилось выше, циркулирующие аутоантитела имеют сходную направленность по отношению к трансмембранной части NC16A коллагена XVII (рис. 2). Что касается человека, то варьирующийся процент пациентов также располагает наличием антител, специфичных к эпидермальному протеину BPAG1, который еще не удалось выявить у собаки и кошки.
1.5. Лечение и прогноз
Заболевание у людей очень хорошо поддается лечению кортикостероидными препаратами, и ремиссия может протекать спонтанно без формирования рубцов. Подобных данных в отношении собаки и кошки также не найдено.
2. Линейный дерматоз у собаки, кошки и человека, опосредованный IgA (DIGAL)
2.1. Общее представление
Линейный дерматоз у собак и кошек, а также у человека, вызываемый IgA, имеет буллезную форму. Согласно немногочисленным публикациям, это заболевание редко встречается у взрослых людей и детей («хроническое буллезное заболевание ребенка») и характеризуется персистенцией депо IgА на всей протяженности базальной мембраны (R.P. Hall, 1999; A. Ichiko, 1998). Как и при буллезном пемфигоиде, циркулирующие антитела ориентированы по отношению к сиблированному коллагену XVII. В данном случае речь идет об экстрацеллюлярной фракции и протеолизе молекулы (рис. 2).
Женщины к данному заболеванию имеют предрасположенность в возрасте старше 40 лет. И наоборот, симптомы ювенильной формы данного заболевания отмечают в возрасте 5 лет (F. Woinarowska et coll., 1988).
Линейный дерматоз с персистенцией IgА недавно был описан у двух взрослых собак (T. Olivry et coll., 2000).
2.2. Клиническая картина заболевания
Клиническая картина данного заболевания в основном носит гетерогенный характер и в основном проявляется в форме повреждения кожного покрова (область колена, локтя и т.д.), затем слизистых (полости рта, конъюнктивы глаз) (R.P. Hall, 1999). Эти нарушения имеют форму папулы (иногда они группируются), а также буллы и везикула (пузырька). В отличие от буллезного пемфигоида, для линейного дерматоза у собак и кошек, спровоцированного IgА, характерно формирование рубцов. Также отмечают выраженный прурит (R.P. Hall, 1999).
У собаки при данном заболевании преобладают изъязвления (полость рта, голова, конечности, подушечки лап), тогда как у человека при данной патологии выявляют большое количество пузырьков (иногда группирующихся) (R.P. Hall, 1999).
2.3. Гистоморфологическая картина
Как и при других глубоких формах буллезного заболевания, с помощью гистоморфологического исследования выявляют отслоение на уровне дермо-эпидермального сочленения. Но особенность этого заболевания характеризуется большим количеством нейтрофилов, персистирующих в зоне расслоения (R.P. Hall, 1999).
У собаки при гистоморфологическом исследовании кожного покрова отмечают сходство (T. Olivry et coll., 2000), заключающееся в субэпидермальном отслоении (фото 6) и присутствии нейтрофилов, локализующихся внутри самого повреждения (один случай).
Фото 6. Линейный дерматоз у собак и кошек с IgА. Гистологический срез на уровне дермо-эпидермального расслоения (окраска НЕ, ×25). |
2.4. Иммунологическая и патогенетическая картина
Для линейного пемфигоида свойственно наличие депо IgА, локализующегося на всей протяженности базальной мембраны, который идентифицируют методом прямой иммунофлуоресценции (R.P. Hall, 1999; A. Ichiko, 1998) и отсутствие IgG, что характерно для буллезного пемфигоида, а также пемфигоида слизистых и вторичного (приобретенного) буллезного эпидермолиза. По всей вероятности, эти депо обнаруживали на разных уровнях базальной зоны (в зеркальной пластине и под ней). Следовательно, вполне вероятно, что многие протеины являются сиблированными (становятся мишенью) по отношению к IgА (R.P. Hall, 1999). Тем не менее, протеин-мишень, который удалось идентифицировать до настоящего времени, относится к коллагену ХVII. Но речь в данном случае идет о частичном расщеплении молекулы (97 и 120 Кd).
Так же как и у человека, у собаки депо IgА выявляют методом прямой иммунофлуоресценции (фото 7); намного реже у человека отмечают персистенцию IgG , IgМ и фракцию комплемента С3 (R.P. Hall, 1999).
Фото 7. Линейный дерматоз у собак и кошек с IgА. Прямой метод иммунофлюоресценции. Депо IgA на уровне дермо-эпидермального сочленения (х 25). |
Методом непрямой иммунофлуоресценции удается идентифицировать IgА (и IgG), который циркулирует и фиксируется со стороны эпидермального слоя (отслоение, искусственно вызванное поваренной солью), что позволяет выявить мишень, локализующуюся на верхней части зеркальной пластины (lamina lucida). Как и у человека, методом иммунотрансфертного анализа2 было идентифицировано два сиблированных протеина, то есть две части коллагена XVII (120 и 97 Кd), подверженного протеолизу.
2Иммунотрансфертный анализ — это метод иммунологического исследования, предназначенный для выявления некоторых антигенов, разделенных с помощью электрофореза; затем их переносят на твердый субстрат (поверхность) и идентифицируют с помощью радиоактивных зондов (метод d’Edwin Southern, 1975, на англ. SOUTHERN-blot) для выявления ДНК. Обнаружение РНК осуществляют методом NORTHERN-blot. Метод WESTERN-blot используют для идентификации известных протеинов с помощью антител, которые обнаруживают методом ИФА (иммуноферментного анализа), где индикатором является краситель. Этот метод используют для серологического исследования на VIH (вирус иммунодефицита у человека). На английском: SOUTHERN — южный; NORTHERN — северный и WESTERN — западный.
2.5. Лечение и прогноз
У человека спонтанная ремиссия встречается редко, но заболевание очень хорошо поддается воздействию дапсона и сульфапиридина (R.P. Hall, 1999). У ребенка это заболевание в основном регрессирует спонтанно, в течение двух лет.
Аналогичных исследований в отношении собаки нет.
3. Пемфигоид слизистых
3.1. Общее представление
Пемфигоид слизистых (еще называют «рубцующийся пемфигоид») — это аутоиммунное буллезное заболевание у человека, в основном проявляющееся в виде повреждения на уровне слизистых и кожно-слизистого соединения (T.E. Fleming, N.J. Korman, 2000; C. Scully et coll., 1999), иногда с отсутствием рубцов (C. Scully et coll., 1999).
У человека это заболевание встречается редко, но речь в данном случае идет о буллезном аутоиммунном заболевании, которое наиболее часто встречается после буллезного пемфигоида (T. Olivry et coll., 2001). Женщины, по сравнению с мужчинами, в два раза чаще страдают этим заболеванием (T.E. Fleming, N.J. Korman, 2000; S.D. Vincent et coll., 1993).
Семнадцать собак и две кошки, подверженные пемфигоиду слизистых, недавно были исследованы с целью выявления свойств и природы данного заболевания (S.D. Vincent et coll., 1993; S.D. Balding et coll., 1996). Вероятно, пемфигоид слизистых — это наиболее часто встречаемая форма аутоиммунного заболевания на уровне базальной мембраны у собаки (S.D. Vincent et coll., 1993).
Взрослые особи и породная предрасположенность были описаны у представителей собачьих (немецкая овчарка и помесная лайка), но речи о наследственной передаче данного заболевания пока еще не идет (S.D. Vincent et coll., 1993).
3.2. Клиническая картина заболевания
У человека повреждения (изъязвления, более редко встречаемые интактные пузырьки) обнаруживают в основном на уровне слизистых (полость рта, конъюнктива глаза, слизистая носа, глотка, гортань, пищевод, пенис, влагалище, анус) и значительно реже на кожном покрове (T.E. Fleming, N.J. Korman, 2000).
Как и у человека, у кошки и собаки дерматоз характеризуется поражением одной или нескольких слизистых оболочек и на уровне кожно-слизистого соединения (внутренняя поверхность вестибулярной части наружного слухового прохода, морда, полость рта, конъюнктива глаза, препуций и влагалище). Описанные повреждения варьируются от простой депигментации до более выраженных нарушений, таких как буллы, эрозии или изъязвления (фото 8–11) (S.D. Vincent et coll., 1993).
3.3. Гистоморфологическая картина
Гистоморфологический анализ указывает на сходные свойства заболевания человека и двух видов цитируемых нами животных: отслоение на уровне дермо-эпидермального сочленения как раз ниже зубчатой пластины (lamina densa) с почти полным отсутствием клеток воспалительной природы, что позволяет дифференцировать буллезный пемфигоид (присутствие эозинофилов) от DIGAL или буллезного приобретенного эпидермолиза (присутствие нейтрофилов) (фото 12) (S.D. Vincent et coll., 1993; L.S. Chan, 1997).
Фото 12. Пемфигоид слизистых. Гистологический срез. Расслоение на уровне дермо-эпидермального сочленения с формированием пузырька (окраска НЕ, ×10). |
3.4. Иммунологическая картина и патогенез
У человека депо IgG, IgA, IgM и фракция комплемента С3 визуализируются с помощью метода прямой иммунофлуоресценции (L.S. Chan et coll., 1997). Циркулирующие аутоантитела (IgG) фиксируются на верхней части отслоения, искусственно вызванного поваренной солью и позвляют распознать NC16А — часть коллагена ХVII, что также имеет место в случае приобретенного буллезного пемфигоида (D.T. Woodley et coll., 1999). У некоторых пациентов циркулирующие аутоантитела находятся на нижней части отслоения по отношению к сиблированному ламинину 5 или пластину 6 (также это относится к интрацеллюлярной части интегрина-α6β4 при окулярной форме поражения) (T. Olivry et coll., 1998).
У собаки и кошки с дерматозом линейное депо выявляют в 100% случаев (и небольшое скопление IgG и комплемента С3). Присутствие циркулирующих аутоантител, направленных против фракции NС16А коллагена XVII, выявляют методом непрямой иммуннофлуоресценции, а также с помощью иммуннотрансфертного анализа и ELISA (фото 13). У собаки аутоантитела определяют на С-концевом участке коллагена XVII. Аутоантитела, направленные против цепи-α3 ламинина 5, были выявлены в сыворотке крови тестируемых кошек (S.D. Balding et coll., 1997), но ни у одной собаки таким способом их обнаружить не удалось.
Фото 13. Пемфигоид слизистых. Непрямой метод иммунофлуоресценции с накоплением IgG на уровне дермо-эпидермального сочленения (увеличение ×10). |
3.5. Лечение и прогноз
Эволюция заболевания варьируется в зависимости от численности, локализации и тяжести повреждений на слизистой (наличие или отсутствие рубцов) (T.E. Fleming, N.J. Korman, 2000; S.D. Vincent et coll., 1993).
Пемфигоид слизистых, описанный у человека, имеет сходство с этим дерматозом у собаки и кошки. Однако некоторые отличия отмечают в основном на уровне протеинов, вовлеченных в патогенез заболевания (см. выше).
Так же следует обратить внимание, что нюансы проявления клинической картины заболевания (и незначительные гистоморфологические признаки), являются основным элементом в постановке диагноза, потому что при буллезном пемфигоиде также персистирует сиблированный антиген, относящийся к фракции NС16А коллагена ХVII: таким образом, согласно недавнему консенсусу, если кожные повреждения преобладают, то следует говорить о буллезном пемфигоиде, и наоборот, если у животного нарушение отмечают на уровне слизистых, то диагноз следует ставить на пемфигоид слизистых.
4. Приобретенный буллезный эпидермолиз
4.1. Общее представление
Приобретенный буллезный эпидермолиз у человека — это хроническое заболевание, при котором мы выявляем наличие аутоантител к сиблированному коллагену VII (рис. 1) (D.T. Woodley et coll., 1999).
Дерматоз также был описан и у собаки (T. Olivry et coll., 1998, 2000). Что касается генерализованной формы данного заболевания (см. ниже), то более половины случаев отмечают у немецкого дога (T. Olivry et coll., 1998).
4.2. Клиническая картина
У человека описано менее четырех клинических признаков:
- Классическая «механобуллезная» форма, характеризуется наличием булл без персистенции локального воспалительного процесса на уровне рук, стоп, коленей и локтей. Эта форма заболевания также проявляется некоторой слабостью кожного покрова и завершается рубцеванием.
- «Воспалительная» форма заболевания имеет сходство с буллезным пемфигоидом, сопровождающимся воспалением в самих буллах (волдырях), локализующихся на корпусе тела, конечностях и складках кожного покрова. Для этих волдырей характерна тургесцентность (как, собственно, и при буллезном пемфигоиде). Крапивница и прурит также имеют место. В данном случае отсутствует рубцевание и слабость кожного покрова.
- Форма, сходная с рубцующимся пемфигоидом, характеризующаяся повреждением слизистых.
- Локальная форма — Brunsting-Perry с повреждением на уровне головы, шеи, где также отмечается формирование рубцов.
Воспалительная и локальная форма приобретенного буллезного эпидермолиза была описана и детализирована у собаки: - Генерализованная форма: имеется сходство с генерализованными формами «воспалительного» заболевания у человека (или схожесть с буллезным пемфигоидом): присутствие пузырьков (фото 14) и изъязвлений вследствие эритематозного раздражения или крапивницы (W.R. Gammon, R.A. Briggman, 1993).
Фото 14. Приобретенный буллезный эпидермолиз у немецкого дога. Отмечается наличие интактных вздутий на внутренней поверхности ушной раковины. |
- В отличие от человека, повреждения (везикулярные, затем быстро изъязвляющиеся), вероятно локализуются преимущественно на слизистых, в зонах трения и точках давления (подушечки лап) (фото 15, 16). Генерализованная форма крапивницы может предшествовать этим нарушениям. Усугубляется общее состояние животного.
- Локальная форма описана у молодой немецкой овчарки (11 мес.), имеющей нарушения на уровне головы и шеи (пузыри, изъязвления и рубцы).
4.3. Гистоморфологическая картина
У кошек и собак с дерматозом иногда трудно дифференцировать это заболевание от буллезного пемфигоида при проведении гистоморфологического исследования и, в основном, при воспалении, для которого характерна персистенция эозинофилов, нейтрофилов и лимфоцитов, локализующихся вокруг или в зоне отслоения (фото 17, 18).
4.4. Иммунологическая и патогенетическая картины
У человека персистирует депо IgG и комплемента С3, которые визуализируются на зубчатой пластине при использовании метода прямой иммунофлуоресценции, и ауто-антитела, направленные против коллагена VII (D.T. Woodley et coll., 1999).
У собаки толстый слой депо выявлен по всей протяженности базальной мембраны в отслоенном и интактном участках (фото 19). С помощью метода непрямой иммунофлуоресценции удалось исключить персистенцию Ig А, Ig М и С3, в то время как депо IgG было обнаружено со стороны дермального слоя при использовании поваренной соли, которая способна вызывать отслоение (фото 20).
Как и у человека, коллаген VII также был представлен как протеин, сиблированный по отношению к антителам (T. Olivry et coll., 2000).
4.5. Лечение и прогноз
У человека вторичный буллезный эпидермолиз очень тяжело поддается лечению и не отвечает на применение классических иммуносупрессоров.
Персистенция повреждений, несмотря на высоко иммуносупрессивное воздействие, вызывает необходимость эвтаназии собаки (T. Olivry et coll., 2000).
5. Буллезная волчанка
5.1. Общее представление
Буллезная волчанка — это редко встречаемое заболевание, которое не так давно было открыто у человека (20 лет назад) (W.R. Gammon, R.A. Briggman, 1993). Оно характеризуется развитием приобретенного буллезного эпидермолиза на кожном покрове у пациентов, подверженных системной волчанке.
У человека установлено присутствие двух форм буллезной волчанки, которые отличаются наличием (форма 1) или отсутствием (форма 2) ауто-антител в сыворотке крови больного. Что касается формы 2, то аутоантитела персистируют в кожном покрове. Также встречается форма 3, при которой, до настоящего времени, еще не удалось выявить персистенцию аутоантигена, сиблированого к аутоантителам, имеющего отличие от коллагена VII (J.A. Yell, F. Woinarowska, 1997).
У французской болонки в возрасте 4-х лет было описано данное заболевание, которое имело сходство с таковым (форма 1) у человека (T. Olivry et coll., 1999).
5.2. Клиническая картина
Что касается человека, то у пациентов, подверженных системной волчанке, отмечают, как правило, наличие широких вздутий (булл) на поверхности кожного покрова (T. Olivry et coll., 2000).
В литературе также описывается аналогичная форма системной волчанки у одной собаки. В дальнейшем, у этого животного повреждения кожного покрова перешли в фазу изъязвления и формирования корочек, локализующихся в подмышечной впадине, на грудной клетке, внутренней поверхности наружного слухового прохода, складках губ, а также на плантарной поверхности подушечек и в полости рта (T. Olivry et coll., 1999).
5.3. Гистоморфологическая картина
У человека, как и у собаки с дерматозом, гистоморфологическая картина имеет сходство с таковой приобретенного буллезного эпидермолиза, с отслоением на уровне дермо-эпидермального сочленения, локализующегося в зубчатой пластине (lamina densa).
5.4. Иммунологическая и патологическая картина
В первой форме заболевания, как и в случае приобретенного буллезного эпидермолиза, в сыворотке крови выявляют аутоантитела, направленные против коллагена VII.
У собаки выявление аутоантител, направленных против коллагена VII, позволило сделать заключение о буллезной форме системной волчанки, имеющей сходство с формой 1, описанной у человека.
5.5. Лечение и прогноз
В описанном случае методом иммуносупрессивного воздействия при назначении преднизона (2 мг/кг 2 раза в сутки в течение 3-х недель) и дапсона (1 мг/кг 3 раза в сутки) позволило сразу же добиться улучшения состояния кожного покрова (T. Olivry et coll., 1999).
Заключение
Благодаря прогрессу изучения заболеваний в области дерматологии, в последнее время появилась возможность более качественно детализировать буллезные заболевания у собаки и кошки, регруппированные под общим названием «буллезный пемфигоид».
Как и у человека, белки базальной мембраны могут быть подвержены сиблированию, то есть стать мишенью для аутоантител и являться, таким образом, маркерами проявления клинических, гистоморфологических и иммунологических признаков. Все это имеет очень большое значение, потому что благодаря использованию методов иммунологического исследования появилась возможность дифференцировать и лечить заболевания с разным прогнозом, которые имеют сходства на уровне клинической картины и гистоморфологических признаков.
СВМ 6/2005