Оценка тромбоцитов и лейкоцитов в мазках крови

3

Н. Пулетти

 

 

Помимо оценки эритроцитов обследование мазков крови подразумевает наличие тромбоцитов и лейкоцитов в основном для определения незрелых нейтрофилов, выявления токсических и лимфоцитарных реакций. Исследование тромбоцитов и лейкоцитов в мазках крови является важнейшим этапом диагностики воспалительных нарушений и причин кровоточивости.

 

Оценка тромбоцитов

 

Оценка тромбоцитов путём подсчёта показана, в частности, когда клиническая картина указывает на возможную тромбоцитопению (петехии, экхимозы — обширные кровоизлияния под кожей или слизистой; мелена; эпистахис — носовое кровотечение; гематурия и т.д.). Если функция тромбоцитов не нарушена, геморрагические проявления возникают обычно при снижении тромбоцитов до 25–50×109/л. Впрочем, даже такое снижение у некоторых животных не приводит к геморрагическому синдрому. Это можно объяснить наличием тромбоцитов наиболее крупного размера или возрастанием их активности. Первый этап проявляется в проверке на наличие сгустков, которые формируются в основном на конце мазка. У здорового животного подсчёт тромбоцитов с помощью гематологического анализатора иногда ошибочно даёт заниженный результат по причине образования крупных сгустков, поэтому возникает необходимость использования мазков крови для пересчёта. Формирование тромбоцитарных сгустков может быть следствием трудного забора крови и недостаточно быстрого переноса материала в пробирку с ЭДТА. Они могут быть также обусловлены плохой гомогенизацией материала, помещённого в пробирку (K.E. Russel, C.B. Grindem, 2000). Но у кошки тромбоциты имеют тенденцию формировать сгустки, что и провоцирует часто ошибочное представление о снижении их во время под счёта (C. Tasker, P.J. Gripps, A.J. Maskin, 1999). И наконец, при аппаратном подсчёте агрегированные тромбоциты иногда ошибочно распознаются как лейкоциты, что искажает результаты исследования.

У собаки и кошки число тромбоцитов, наблюдаемых в поле зрения микроскопа с большим увеличением (× 1000), колеблется в среднем от 10 до 30 клеток. При умножении на 15×109 или 20×109 число клеток соответствует содержанию в 1 л (J.W. Harvey, 2001). У животного с иммунной тромбоцитопенией количество тромбоцитов в поле зрения микроскопа обычно уменьшено (фото 1а и 1б). Снижение количества тромбоцитов в мазке крови при отсутствии сгустков ориентирует врача на избыточное периферическое поглощение (геморрагии, диссеминированное внутрисосудистое свёртывание — ДВС-синдром и т.д.), нарушение формирования в костном мозге или деструкцию, опосредованную иммунной реакцией (рисунок) (S.L. Stockman, M.A. Scott, 2008).

 

 

Фото 1а и 1б. Подсчёт мазков крови с помощью микроскопии (х 1000). Отсутствие тромбоцитов у собаки с тромбоцитопенией, опосредованной иммунной реакцией 1б, сравнение со здоровой собакой 1а.

 

 

Рисунок. Основные причины развития тромбоцитопении, рассматриваемой после окончательного подтверждения с помощью мазков крови

 

Оценка лейкоцитов

 

Исследование морфологии лейкоцитов может дать нам серьёзную информацию. Большое количество гематологических анализаторов даёт общее число лейкоцитов и осуществляет дифференциацию (процент по отношению к общему числу лейкоцитов) в трёх или пяти частях (нейтрофилы, моноциты, лимфоциты, эозинофилы и базофилы). Тем не менее как и для эритроцитов и тромбоцитов, эти современные методы диагностики нередко дают искажённую или неполную информацию по морфологии лейкоцитов, что требует также дополнительного исследования мазка крови.

 

Нейтрофилы

 

Незрелые нейтрофилы

 

При выраженном воспалительном очаге (пиометра, бронхопневмония и т. д.) в периферической крови часто появляются незрелые формы лейкоцитов. На это указывает сдвиг лейкоцитарной формулы влево. Такая картина связана с выраженной потребностью тканей организма в нейтрофилах, при том, что пул зрелых нейтрофилов в костном мозге истощён.

Степень отклонения влево проявляется количеством незрелых нейтрофилов и их уровнем зрелости. Чаще всего сдвиг влево проявляется в увеличении количества несегментированных (палочкоядерных) нейтрофилов (клетки с полосками) (фото 2). При наличии более выраженного очага воспаления иногда наблюдают наличие мета- и миелоцитов (фото 3). Длительное сохранение выраженного отклонения влево, особенно в сочетании с нейтропенией, (дегенеративные отклонения влево) рассматривают как индикатор неблагоприятного прогноза. Иногда несегментированные нейтрофилы можно наблюдать и у здоровых животных.

 

 

Фото 2. Считывание мазков крови с помощью микроскопии (х 1000) у собаки, подверженной острой бронхопневмонии. Присутствие незрелого несегментированного нейтрофила (клетка с полоской) с признаками токсичности (гетерогенная и базофильная цитоплазма) Фото 3. Считывание мазка крови под микроскопом (× 1000) у собаки с пиометрой. Присутствие миелоцита с признаками токсичности (гетерогенная и базофильная цитоплазма)

 

 

Токсические изменения

 

К токсическим изменениям в нейтрофилах относят появление телец Дойла, а также цитоплазматической базофилии, диффузной цитоплазматической вакуолизации и лизиса ядра (J.W. Harvey, 2001). Наличие токсической грануляции (розовые гранулы обычно отсутствуют в зрелых нейтрофилах) также является индикатором токсичности.

Тельца Дойла — это скопление шероховатой формы эндоплазматического ретикулума, образующее голубоватые гранулы. Обнаружение нескольких нейтрофилов с тельцами Дойла у кошки рассматривают как норму (фото 4).

Базофилия цитоплазмы связана с большим количеством шероховатого и полирибосомного ретикулума. Диффузная вакуолизация и лизис ядра проявляются в последнюю очередь, при выраженной токсемии. Обычно изменение степени токсичности сопровождает сдвиг лейкоцитарной формулы влево.

 

 

Фото 4. Считывание мазка крови под микроскопом (× 1000) у здоровой кошки. Визуализируется зрелый (или сегментированный) нейтрофил с тельцами Дойла (стрелочка)
Фото 5. Считывание мазка крови под микроскопом (× 1000) у здоровой кошки. Отмечается наличие реакционного нейтрофила

 

 

Лимфоциты

 

Реакционные лимфоциты

 

Случайно появившиеся реакционные (или реактивные) лейкоциты можно наблюдать при стимуляции антигеном (например, во время вакцинации). Часто эти клетки более крупного размера с базофильной и наиболее обильной цитоплазмой по отношению к малым нормальным лимфоцитам. Хроматин более или менее хорошо конденсированный и нуклеолы в основном не визуализируются (фото 5).

 

Большие гранулёзные лимфоциты

 

Большие гранулематозные лимфоциты в отличие от малых нормальных лимфоцитов имеют бледную, более обильную цитоплазму и содержат пурпурные гранулы (фото 6). Эти клетки относятся к Т-лимфоцитам или естественным киллерам (иммунологические маркёры CD8+). Их число возрастает при инфицировании Ehrlichia canis и при хроническом лимфолейкозе (J.W. Harvey, 2001).

 

 

Фото 6. Считывание мазка крови под микроскопом (× 1000) у здоровой собаки. Наличие большого гранулярного лимфоцита

 

 

Атипичные лимфоциты и лимфобласты

 

Атипичные лимфоциты и лимфобласты значительно крупнее нормальных лимфоцитов. Хроматин в их ядрах с чётко выраженной и слабо концентрированной грануляцией. В лимфобластах, помимо вышесказанного, содержатся выступающие нуклеолы (фото 7). В малом количестве их наличие может быть вызвано воспалением. Возрастание их числа может сигнализировать об остром лимфобластном лейкозе или лимфоме пятой стадии (лимфома с инфильтрацией костного мозга через неопластические лимфоциты). Морфологически лимфобласты бывает трудно дифференцировать от бластов, проявляющихся от других линий клеток, например от миелобластов. Для окончательной идентификации используются современные иммуноцитохимические методы и специфические цитохимические окраски (непосредственно на мазках) (J.A. Ramos-Vara, A.C. Avery, P.R. Avery, 2010).

 

 

Фото 7. Считывание мазков крови под микроскопом (× 1000) у собаки, подверженной острой лимфоидной лейкемии. Отмечается наличие лимфобластов с выступающими нуклеолами и гранулярным хроматином со слабой конденсацией Фото 8. Считывание мазка крови под микроскопом (× 1000) у собаки. Визуализируется морула Еhrlichia spp (стрелочка), наблюдаемая в зрелом нейтрофиле

 

 

Включения

 

В лейкоцитах можно обнаружить микроорганизмы, как, например, Ehrlichia spp, представленная морулой в моноцитах или гранулоцитах (фото 8).

 

Мастоциты (тучные клетки)

 

Мастоциты идентифицируют обычно на концевой и краевой частях мазка. Их можно отличить от базофилов по круглому ядру и большому количеству тёмных вкраплений в виде гранул, способных маскировать ядро. Мастоциты встречаются при воспалении (гиперсенсибилизация), а также при неопластических процессах (системная мастоцитома).

Исследование лейкоцитов и тромбоцитов в мазке крови позволяет быстро диагностировать целый ряд заболеваний, таких как тромбоцитопения или гемопоэтическая неоплазия (например, острый лимфобластный лейкоз). В некоторых случаях своевременная постановка окончательного диагноза существенно улучшает прогноз и быстро ориентирует в выборе терапии. Кроме того, это позволяет оценить тяжесть очага воспаления или уточнить прогноз для животного, находящегося в критическом состоянии.

 


Основные положения

— При отсутствии нарушений функции тромбоцитов геморрагический синдром проявляется при снижении тромбоцитов до 25–50×109/л.

— При выраженном воспалении в мазках крови всегда обнаруживаются незрелые нейтрофилы.

— У кошек наличие нескольких нейтрофилов с тельцами Дойла соответствует норме.

— Атипичные лимфоциты и лимфобласты встречаются в большом количестве при остром лимфобластном лейкозе и лимфоме в пятой стадии.

— При эрлихиозе собак морула Еhrlichia spp. может персистировать в моноцитах или гранулоцитах.


 

 

СВМ № 5/2010

Оценить материал
Нравится
Нравится Поздравляю Сочувствую Возмутительно Смешно Задумался Нет слов
3

Добавить комментарий

Войти с помощью: 

Подписка на новости

После отправки заполненной формы Вам на почту придёт письмо со ссылкой для подтверждения рассылки. Если Вы не видите письма, проверьте папку «Спам». Если не подтвердить рассылку, мы не сможем отправлять её Вам.






Нажимая на кнопку «Подписаться», я даю согласие на обработку персональных данных
Я ознакомлен с политикой конфиденциальности

Close